Conceptos básicos de microscopía: Refracción, índice de refracción y rendimiento de la lente
Refracción, índice de refracción
La luz viaja en línea recta entre dos puntos en un medio isotrópico homogéneo. Al pasar a través de un objeto transparente de diferente densidad del medio, se produce la refracción, que es causada por las diferentes velocidades de propagación de la luz en diferentes medios.
Cuando una luz que no es perpendicular a una superficie transparente entra en un objeto transparente (p. ej., vidrio) desde el aire, la luz cambia de dirección en la interfaz y forma un ángulo de refracción con la normal.
Rendimiento de la lenteØ Las lentes son los elementos ópticos fundamentales que componen el sistema óptico de un microscopio. Los componentes como oculares, objetivos y condensadores están formados por lentes únicas o múltiples. Según su forma, se pueden dividir en dos categorías principales: lentes convexas (lentes positivas) y lentes cóncavas (lentes negativas). Ø Cuando un haz de luz paralelo al eje óptico pasa a través de una lente convexa y converge en un punto, este punto se denomina "punto focal". El plano que pasa por este punto y es perpendicular al eje óptico se llama "plano focal". Hay dos puntos focales: el objeto-punto focal espacial y la imagen-punto focal espacial.
Conceptos básicos de microscopía - Ampliación total
Ampliación total
Ø A través del ocular
Aumento total=Aumento del objetivo × Aumento del ocular (si hay un aumento intermedio, multiplíquelo también por el aumento intermedio)
Ø Cuando está conectado a vídeo
Aumento total=Aumento objetivo × Aumento del adaptador × Factor de aumento de vídeo
Ø Factor de ampliación de vídeo
Tamaño diagonal de la pantalla de visualización/Tamaño del sensor CCD
Conceptos básicos de microscopía - Apertura numérica
Apertura numérica
La apertura numérica, abreviada como NA, es un indicador crítico para evaluar el rendimiento de lentes objetivas y condensadores (especialmente objetivos). NA=n × sin (el producto del índice de refracción n del medio y el seno de la mitad del ángulo de apertura 2 ). El ángulo de apertura, también conocido como "apertura angular", es el ángulo formado entre un punto del objeto en el eje óptico y el diámetro efectivo del elemento de la lente frontal del objetivo. Cuanto mayor sea el ángulo de apertura, mayor será el flujo de luz que ingresa a la lente.-Es directamente proporcional al diámetro efectivo de la lente e inversamente proporcional a la distancia focal.
Cuanto mayor sea el índice de refracción del medio, mayor será el valor de NA.
Cuanto mayor sea el ángulo de apertura, mayor será el valor de NA.
n=índice de refracción del medio entre el objetivo y la muestra
Valores máximos típicos: Objetivo seco (0,9), Objetivo de inmersión en agua (1,2), Objetivo de inmersión en aceite (1,4), Objetivo especial (1,6)
Conceptos básicos de microscopía - Resolución
Resolución
La resolución, también conocida como "poder de resolución", es otro parámetro técnico importante para medir el rendimiento del microscopio.
Resolución=0.61 λ / NA (donde λ es la longitud de onda de la fuente de luz y NA es la apertura numérica de la lente del objetivo)
La resolución de un objetivo de luz visible está determinada por dos factores: el valor NA de la lente del objetivo y la longitud de onda de la fuente de luz de iluminación. Cuanto mayor sea el valor de NA y más corta sea la longitud de onda de la luz de iluminación, mayor será la resolución.
Conceptos básicos de microscopía-(Profundidad de campo sonó)
Cuando se utiliza un microscopio, enfocar un objeto permite una visualización clara no sólo de los puntos en ese plano focal sino también dentro de un cierto espesor por encima y por debajo de él. Este espesor de la porción clara es la profundidad de campo. Una mayor profundidad de campo revela todo el espesor de la muestra, mientras que una menor profundidad de campo muestra sólo una capa delgada.
Objetivo 
Todo el sistema óptico: 
